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En el presente estudio se muestrearon los peces de agua dulce en cuatro estaciones en la cuenca alta del río Chucunaque, adyacente a la Serranía del Darién, entre julio y septiembre de 2002. Se utilizaron varios métodos de pesca para recolectar una representación completa de especies en cada estación como parte de un proyecto más amplio de evaluación ecológica rápida en la Reserva Hidrológica Serranía del Darién. El trabajo de campo se complementó con una exhaustiva revisión bibliográfica de estudios realizados en la misma zona. Se colectaron 19 especies de peces de agua dulce, se hallaron 15 especies endémicas y 18 binacionales, subrayando la importancia de conservar este hábitat. Un total de seis especies están en riesgo según la UICN, señalando la necesidad de medidas de conservación. Este estudio resalta la importancia de esta área para la conservación de la ictiofauna y sugiere más investigación y medidas de conservación. Un 57 % de las especies de peces de agua dulce informadas para el área de estudio son utilizadas de alguna manera por las comunidades locales.