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Los macrohongos son organismos encargados de la descomposición de todos los elementos muertos de un bosque, reciclan la materia y sin ellos el ecosistema mantendría muchos restos orgánicos sin aprovechamiento óptimo del mismo. En Panamá, los macrohongos son organismos muy poco estudiados, para la provincia de Colón los estudios son escasos. Es por eso que el objetivo de esta investigación consistió en caracterizar los macrohongos en un fragmento de bosque secundario de la comunidad de Guanche. La metodología desarrollada permitió la realización de muestreos (colectas) en un transecto con una longitud de 1000 m y 10 m de borde de camino. Los macrohongos fueron identificados con literatura especializada y los mismos fueron depositados en el Herbario de la Universidad de Panamá (PMA). Se obtuvo como resultado 53 especímenes (6 especies de la División Ascomycota y 47 especies de la División Basidiomycota). La División Basidiomycota representó un 88.2%, siendo el grupo con mayor presencia en el bosque mientras que la División Ascomycota representó un 9.8% de las especies. La preferencia de sustrato fue diversa, incluyendo madera (69,2%), hojarasca (25%), estiércol (4%) e insectos (1%). Este estudio proporciona una valiosa contribución al entendimiento taxonómico y ecológico de los hongos en Panamá, arrojando luz sobre su papel en los ecosistemas forestales y proporcionando información relevante para estrategias de conservación y manejo dentro de la provincia de Colón.